雞冠狀病毒滅活檢測
雞傳染性支氣管炎是雞的唯一的一種冠狀病毒病,是由冠狀病毒科冠狀病毒屬雞傳染性支氣管炎病毒(IBV)引起的,該病對養(yǎng)雞業(yè)危害較大,應(yīng)高度重視其防治工作。流行特點(diǎn)是病雞為主要傳染源,病毒在病雞糞便中可存活12~56天。病雞的糞便、口鼻分泌物、呼出的氣體,被污染的空氣、用具、飼料和飲水,會(huì)通過呼吸道、消化道傳染給易感雞。一年四季均可發(fā)生,以冬季發(fā)病較多。咨詢電話: 13816144967 (微信同號(hào))
雞冠狀病毒滅活檢測方案:
A、實(shí)驗(yàn)資料:SPF雞胚,并自行孵化至10日齡。雞傳染性支氣管炎病毒采用 IBV QXL87株種毒。實(shí)驗(yàn)所用稀釋液:生理鹽水(0.9% NaCl)高壓滅菌,并保管于4℃冰箱。
B、實(shí)驗(yàn)對象:1號(hào)保管液(滅活保管液)、2號(hào)保管液(非滅活型病毒保管液)。
C、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容:分為兩局部
不同病毒保管液滅活效果的雞胚感染比擬
將制備好的雞傳染性支氣管炎病毒 QXL87株種毒添加至保管液中,按1(病毒原液):10(保管液) 比例,置室溫18-26℃滅活45min;將滅活好的病毒液接種SPF雞胚停止滅活檢驗(yàn),同時(shí)對收獲尿囊液停止雞傳染性支氣管炎病毒核酸檢測,參照GB/T 23197-2008 雞傳染性支氣管炎診斷技術(shù),運(yùn)用RNA提取試劑盒提取RNA,并運(yùn)用禽源冠狀病毒核酸檢測試劑盒(PCR熒光探針法)檢測。
雞冠狀病毒滅活檢測結(jié)果:
選擇適宜的病毒保管液對病毒停止滅活,按獸藥典請求停止滅活檢驗(yàn)。將滅活好樣品按尿囊腔接種方式接種10日齡SPF雞胚,每個(gè)樣品接種10枚雞胚,0.1 mL/枚,置于37℃培育箱中培育144 h,棄去24 h死亡的雞胚,察看記載24-144 h雞胚死亡狀況和接種后有病變的活胚數(shù)的數(shù)量。察看雞胚病變,同時(shí)收獲尿囊液停止PCR檢測,即為第一代接種核酸檢測結(jié)果。然后將第一次收獲的四個(gè)尿囊液停止二次雞胚接種,培育144h后收獲尿囊液停止PCR檢測,即為第二代接種核酸檢測結(jié)果。咨詢電話: 13816144967 (微信同號(hào))