呼吸道合胞病毒(RSV)滅活檢測
呼吸道合胞病毒(Respiratory syncytial virus, RSV)屬于副黏病毒科的肺病毒屬(Pneumovirus),只有一種血清型。主要引起6個(gè)月以下嬰兒患細(xì)支氣管炎和肺炎等下呼吸道感染,以及較大兒童和成人的鼻炎、感冒等上呼吸道感染。咨詢電話: 13816144967 (微信同號(hào))
呼吸道合胞病毒滅活檢測項(xiàng)目:
甲型流感、乙型流感、呼吸道合胞病毒、腺病毒、副流感病毒Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型。
RSV病毒滅活檢測方法:
直接免疫熒光法、間接免疫熒光法、橋聯(lián)酶標(biāo)免疫法、ELISA法、病毒分離法、PCR法及核酸雜交法等。
呼吸道合胞病毒滅活方案:
下面以直接免疫熒光法為例,1.標(biāo)本的采集將配套的絨植拭子經(jīng)鼻腔插人到達(dá)鼻咽部約7~8cm。來回旋轉(zhuǎn)2~3次后迅速抽出拭子,放人加有3mLPBS(10×)的塑料試管中,蓋上蓋子送檢。
2.標(biāo)本處理將絨植拭子標(biāo)本在漩渦混勻器上輕微混勻3下(約30S),見渾濁后去掉絨植拭子。以700×g離心10rain。棄去上清液(留約100~150IxL),吸管吹打混勻,形成混濁細(xì)胞懸浮液。
3.標(biāo)本制片標(biāo)本點(diǎn)樣在載玻片上(約10~l5L),電吹風(fēng)機(jī)冷風(fēng)下風(fēng)干10~15min至干燥,浸沒在冷丙酮中固定10min,取出晾干。
4.標(biāo)本反應(yīng)每份標(biāo)本分別加D3試劑1滴(25),必須完全覆蓋待測標(biāo)本。將載玻片放在濕盒中置于37℃培養(yǎng)箱(或放在泡沫上置于37℃水浴箱)孵育15~30min。載玻片用PBS沖洗1次,后浸沒在PBS中洗2次(PBS不能重復(fù)使用)。
5.標(biāo)本觀察玻片中央加1滴封閉液,蓋上蓋玻片。
呼吸道合胞病毒滅活檢測注意事項(xiàng):
不同季節(jié)呼吸道病毒感染情況分析經(jīng)檢驗(yàn),不同季節(jié)呼吸道病毒的感染率不同(P<0。05)。由于本研究標(biāo)本在12月~5月問采取,經(jīng)歷了冬季、春季。隨著氣溫的升高,病毒的檢出率逐漸降低,冬季要明顯高于春季。另外,雖然隨著氣候變暖,RSV的檢出率降低,但在7種病毒中仍占主要地位;PIV3檢出率增加的幅度較大。咨詢電話: 13816144967 (微信同號(hào))