犬瘟熱病毒滅活檢測

犬瘟熱病毒（caninedistempervirus，CDV），是一種單鏈RNA病毒。在室溫下，該病毒相對不穩(wěn)定，尤其對紫外線、干燥及50～60℃以上的高溫敏感。在冷凍條件下，該病毒可存活數(shù)周。多數(shù)常規(guī)消毒均可將CDV殺滅。CDV主要通過空氣和飛沫水平傳播。病犬是重要的傳染源，并通過尿液長期排毒，污染周圍環(huán)境。臨床癥狀主要局限于上呼吸道，所以咳嗽、流鼻涕會很明顯。咨詢電話: 13816144967 (微信同號)

犬瘟熱病毒滅活檢測對象：

3%甲醛、乙醚、三氯甲烷、3％燒堿、季銨鹽消毒液、來蘇爾等

水貂犬瘟熱、細(xì)小病毒性腸炎二聯(lián)滅活疫苗制備及其質(zhì)量評價(jià)

本研究制備了水貂犬瘟熱、細(xì)小病毒性腸炎二聯(lián)滅活疫苗3批，通過病毒液檢驗(yàn)、半成品檢驗(yàn)及成品檢驗(yàn)，顯示所生產(chǎn)的滅活疫苗工藝穩(wěn)定，批間差異小，成品接種水貂安全無副反應(yīng)；采用血清抗體測定和免疫攻毒方法對3批滅活二聯(lián)苗進(jìn)行免疫效果研究，結(jié)果顯示，免疫接種21 d，水貂犬瘟熱中和抗體可達(dá)1:51～1:91，水貂細(xì)小病毒HI抗體可達(dá)1:64～1:256，經(jīng)免疫攻毒，可抵抗100 ID50的犬瘟熱強(qiáng)毒和水貂細(xì)小病毒強(qiáng)毒的攻擊，具有較好的免疫效果。

水貂犬瘟熱-細(xì)小病毒性腸炎二聯(lián)活疫苗的方法，其特征在于包括以下步驟:咨詢電話: 13816144967 (微信同號)

(1)將所述的水貂細(xì)小病毒弱毒株MEVB-F61接種在貓腎細(xì)胞F81或CRFK上進(jìn)行病毒擴(kuò)增培養(yǎng)，每日觀察細(xì)胞病毒情況，待細(xì)胞病變達(dá)到80%左右時(shí)即可通過反復(fù)凍融的方法收獲病毒液，并進(jìn)行病毒滴度、純凈性檢驗(yàn)，將檢驗(yàn)合格的病毒液保存于-20°C。

[(2)水貂犬瘟熱病毒弱毒疫苗株CDV3-CL接種于非洲綠猴腎細(xì)胞Veix)上進(jìn)行病毒擴(kuò)增培養(yǎng)，每日觀察細(xì)胞病毒情況，待細(xì)胞病變達(dá)到80%左右時(shí)通過反復(fù)凍融的方法收獲病毒液，并進(jìn)行病毒滴度、純粹性檢驗(yàn)，將檢驗(yàn)合格的病毒液保存于-20°C;

(3)將步驟(1)和(2)收獲的病毒液混合均勻，加入凍干保護(hù)劑混合，定量分裝于無菌的安瓶內(nèi)，加蓋置于凍干機(jī)內(nèi)預(yù)凍、干燥，即得。

在本發(fā)明所述的方法中，優(yōu)選的，疫苗成品中犬瘟熱病毒滴度> 104 7頭份，水貂細(xì)小病毒滴度>105.5/頭份。

進(jìn)一步的，本發(fā)明還提出了所述的水貂犬瘟熱-細(xì)小病毒性腸炎二聯(lián)活疫苗在制備預(yù)防水貂犬瘟熱和細(xì)小病毒性腸炎藥物中的應(yīng)用。

本發(fā)明的二聯(lián)苗經(jīng)安全性試驗(yàn)結(jié)果表明，經(jīng)過單劑量(犬瘟熱病毒滴度> 104 7頭份，水貂細(xì)小病毒滴度> 105.5/頭份)、單劑量重復(fù)和10倍劑量接種水貂，體溫、食欲、精神狀態(tài)等生理指標(biāo)均表現(xiàn)正常，無任何臨床癥狀，剖檢觀察水貂主要臟器均無病變，證明水貂犬瘟熱-細(xì)小病毒性腸炎二聯(lián)活疫苗對水貂安全；

效力試驗(yàn)表明，單劑量接種疫苗后，可保護(hù)水貂免于犬瘟熱病毒、細(xì)小病毒檢驗(yàn)用強(qiáng)毒的攻擊，有效預(yù)防水貂犬瘟熱、細(xì)小病毒性腸炎的發(fā)生。一次免疫接種3周、3個(gè)月后，水貂對犬瘟熱病毒、細(xì)小病毒的保護(hù)率均為100% ;—次免疫接種6個(gè)月后，水貂對犬瘟熱病毒、細(xì)小病毒的保護(hù)率均為95% ;—次免疫接種9個(gè)月后，水貂對犬瘟熱病毒、細(xì)小病毒的保護(hù)率分別為85%和90%。疫苗的免疫期定為6個(gè)月。-8-10°C的保存期定為12個(gè)月，-15-20°C疫苗的保存期為15個(gè)月。咨詢電話: 13816144967 (微信同號)